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小孩与亲生父母及叔叔婶婶间的亲权关系鉴定

来源:《真科检》  作者: 张勇  日期:2020-11-11

  亲子鉴定是指应用生物学、遗传学以及法医学等方法对人类的遗传标记物进行检测从而分析出不同个体之间的血缘关系。对于亲缘关系比较近的个体之间,想鉴定出是否为亲子关系会有一定的困难。

  目前在二联体亲子鉴定中,由于缺少父母一方的遗传信息,尤其当争议父和生父之间存在近亲血缘关系时,就会对鉴定结果的判断带来一定的风险。

  因为当争议父和生父之间存在近亲血缘关系时,常染色体上等位基因相同的比例会很高,这样就很难鉴定出争议父与孩子之间的亲子关系。本文就近亲之间亲子关系鉴定的案例进行分析。

  1、材料与方法

  1.1 案例

  小孩办理户口时登记在叔叔(小孩生父的兄弟)家的户口上,现因小孩上学需迁回至亲生父母户口上,户籍办理单位要求出具小孩与四人之间的亲子鉴定意见书,当事人特委托我中心办理小孩与亲生父母之间的亲权关系鉴定和小孩与叔叔婶婶之间的亲权关系鉴定。

  1.2 样本采集

  用指尖采血法将被鉴定人的血液样品采集到 FTA 血卡,编号后送至实验室。

  1.3 主要仪器设备与试剂

  检测主要仪器有 PCR 仪(ABI 9700)、3130XL 电泳仪(ABI)等,主要试剂有 MicroreaderTM 21 Direct ID System(阅微基因)、MicroreaderTM 23sp ID System(阅微基因)等。

  1.4 检测方法

  用 Chelex-100 法提取血样 DNA,然后用 MR21 和 MR23 试剂盒进行 PCR 扩增,反应体系和扩增程序按照阅微试剂说明书进行,同时设立阳性对照和阴性对照。待 PCR 扩增完成后在 AB3130XL 电泳仪上进行 STR 分型。

  1.5 统计分析

  电泳结果用 GeneMapper 软件处理分析,依据被鉴定人的 STR 分型结果计算小孩和生父生母、叔叔婶婶之间的累积亲权指数。

  2、结果

  2.1 小孩和生父生母之间的亲权关系鉴定

  用 MR21 试剂盒对小孩和亲生父母的 20 个常染色体遗传位点进行 STR 分型检测,发现小孩和生父生母之间均符合孟德尔遗传规律,累积亲权指数(CPI)为4.2467×10^12.

  2.2 小孩和婶婶之间的亲权关系鉴定

  用 MR21 试剂盒对小孩和婶婶的 20 个常染色体遗传位点进行 STR 分型检测,发现小孩和婶婶之间有 11 个位点不符合孟德尔遗传规律(见表 1),累积亲权指数(CPI)为 4.9377×10^-30.

表 1 小孩和婶婶不符合遗传规律位点的 STR 分型

小孩和婶婶不符合遗传规律位点的 STR 分型

  2.3 小孩和叔叔之间的亲权关系鉴定

  用 MR21 试剂盒对小孩和叔叔的 20 个常染色体遗传位点进行 STR 分型检测,发现小孩和叔叔之间有 1 个位点不符合孟德尔遗传规律(见表 2),累积亲权指数(CPI)为 1.0919×10^5.

表 2 小孩和叔叔不符合遗传规律位点的 STR 分型

小孩和叔叔不符合遗传规律位点的 STR 分型

  2.4 小孩和生母、叔叔之间的亲权关系鉴定

  用 MR21 试剂盒和 MR23 试剂盒对小孩和生母、叔叔的 39 个常染色体遗传位点进行 STR 分型检测,发现小孩和生母、叔叔之间有十个位点不符合孟德尔遗传规律(见表 3)。

表 3 小孩和生母、叔叔之间不符合遗传规律位点的 STR 分型

小孩和生母、叔叔之间不符合遗传规律位点的 STR 分型

  3、讨论

  本案例中,小孩和叔叔之间的社会关系为叔侄关系,属于近亲血缘关系鉴定的案件。本次检测均使用阅微MR21试剂和MR23试剂对被鉴定人的常染色体进行了STR分型。

  根据实验结果,小孩和生父生母之间的20个常染色体位点均符合孟德尔遗传规律,累积亲权指数(CPI)为4.2467×10^12,可以认定为生父和生母为小孩的生物学父母亲。

  小孩和婶婶之间的20个常染色体基因座中,D5S818、D21S11、D18S51、D13S317、D16S539、CSF1PO、D2S441、Penta E、D12S391、D2S1338和FGA共十一个位点不符合孟德尔遗传规律,累积亲权指数(CPI)为4.9377×10^-30,排除婶婶为小孩的生物学母亲。

  小孩与叔叔之间的鉴定中,20个常染色体基因座中只有一个位点不符合孟德尔遗传规律,按照正常的二联体鉴定,会将这种情况视为STR基因突变。

  在D18S51基因座,小孩与叔叔之间是一步突变,有研究报道STR基因座的突变表现为完整重复单位的增加或减少,其突变机制是复制滑动或者滑链错配,也就是在DNA复制过程中,STR基因座核心序列重复单位发生碱基错配,1个或几个重复区域形成环状,使新生链与模板链长度不匹配,发生单个重复单位的增减。

  根据二联体突变的计算方法得出累积亲权指数(CPI)为1.0919×10^5,故支持叔叔为小孩的生物学父亲。这与特定事实不符,因为小孩已经有生物学父亲,所以在单亲亲子鉴定中,需要增加基因座的检测数量来提高准确率。N.von Wurmb-Schwark研究了125对叔侄关系的亲权鉴定,发现有4%是完全符合孟德尔遗传定律的。

  根据孟德尔遗传定律,对某一特定的基因座而言,父代必定只能传递1 个等位基因给子代,父子间只有1 个同源等位基因;叔侄或爷孙没有同源基因的概率为1/2、有1 个同源基因的概率为1/2、有2 个同源基因的概率为0.

  由此可见,叔 侄之间有1个同源基因的概率并不低,在DNA亲权鉴定中需要谨慎对待。当争议父(母)与生父(母)之间存在血缘关系时,应要求检测所有与案件有关的人员的STR分型,并且增加检测多态性高、无连锁遗传关系的基因座数量。

  通过阅微MR21试剂和MR23试剂对小孩、生母和叔叔之间进行三联体的STR分型检测。在本次三联体鉴定中,由于已经确定生母为小孩生物学母亲,小孩的每个基因座上的等位基因必定有一个由生母提供,判断另外一个等位基因是否由叔叔提供。

  试验发现在检的39个位点中有十个位点的其中一个等位基因不能由叔叔提供,分别是D18S51、D16S539、TPOX、Penta E、D18S535、D15S659、D21S1270、D9S925、D10S1435和D17S1290,不符合孟德尔遗传规律。由此可以判定排除叔叔为小孩的生物学父亲。

  通过本案例可以看出,在未知的情况下,近亲血缘关系之间的二联体鉴定存在着一定的盲区,在鉴定中应当了解基本案情以及被鉴定人之间的社会关系,如有突变等情况存在时应通过加做位点进一步确定鉴定结果的准确性。

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